產(chǎn)品名稱(chēng):
中性蛋白酶/Dispase II/ neutral protease
產(chǎn)品描述:
中性蛋白酶(Neutral protease),商業(yè)名稱(chēng)dispase II,也稱(chēng)分散酶II。來(lái)源于Bacillus polymyxa,無(wú)支原體或其他動(dòng)物病毒污染。一種非特異性金屬蛋白酶,具比較溫和的蛋白水解酶活性,對(duì)細(xì)胞損傷小且可維持細(xì)胞膜完整性,因此非常適合用于分離原代和繼代細(xì)胞培養(yǎng)。研究顯示Dispase II更能有效消化成纖維樣細(xì)胞,相比較于上皮樣細(xì)胞。Dispase II還可用于消除懸浮細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生的細(xì)胞聚集。
產(chǎn)品特點(diǎn):
該酶已被證實(shí)作用迅速有效又溫和;
細(xì)胞能保持完整,細(xì)胞膜無(wú)損;
該酶非哺乳動(dòng)物來(lái)源,不含支原體或動(dòng)物病毒污染;
對(duì)于溫度、pH的改變、以及血清成分都很穩(wěn)定;
使用螯合劑或稀釋就能簡(jiǎn)單滅活;
產(chǎn)品特性:
1.比活力:≥0.8 U/mg (37oC,使用酪蛋白作為底物,pH 7.5)
2.酶活力單位定義:One unit is the enzyme activity which liberates Folin-positive aminoacids and peptides corresponding to 1 μmol (181 μg) tyrosine in 1 minute underassay conditions (pH 7.5, +37 °C).
3.最適PH:6.0-8.5
4.激活劑(Activator): Optimal Ca2+ concentrationis 2 mM. The enzyme preparations contain enough Ca2+ for optimal activity.
5.抑制劑(Inhibitors) : EDTA, EGTA, Hg2+, other heavy metals.Dispase is not inhibited by serum.
6.建議工作濃度(Working concentration):0.6 to 2.4 U/ml
儲(chǔ)存液和工作液的制備方法:
1)儲(chǔ)存液制備:
用Hepes-buffered saline (50mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase至10 mg/ml,可用0.22 um的無(wú)菌濾膜過(guò)濾除菌,保存在+2°~+8°,2W穩(wěn)定,根據(jù)單次用量分裝凍存,2個(gè)月內(nèi)使用有效;不要反復(fù)凍融;
2)工作液制備:
使用時(shí)用合適的細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋到工作濃度即可。一般為0.6-2.4U/ml.不推薦高于2.4 U/ml的 工作濃度,。具體使用濃度請(qǐng)根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系或參考文獻(xiàn)調(diào)整。
儲(chǔ)存和運(yùn)輸:
凍干粉2-8°保存,冰袋運(yùn)輸。